ctDNA高通量测序临床实践专家实质（2022年版）

恶接下来性免疫在突变或坏死月份不断中的拘押退重复系统的DNA相片；其核素深受多种状况负面影响，波动较大，在官民状况同样是用药阻碍下，其携带的生物体讯息不太可能会遭遇的发展，且深受亦然常蛋白质胚系表征或复制接下来性增生蛋白质基础基因突变抑制，在药理学测定和通报点出月份不断中的其所同样注意。

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ctDNA NGS测定的药理学其所用领域

2.1 ctDNA NGS测定在恶接下来性肿瘤显现出病因中的的内涵显现出病因（companion diagnostics，CDx）被指出是恶接下来性肿瘤个接下来性化医疗中的必备的工具，其允许测试交果所提供的讯息足以保证附加用药抑制剂的安全部都是接下来性和理论上接下来性，期望用途为聘请口服，辨别并不需要从特定用药中的给与的病变。ctDNA测定作为CDx在年所的药理学出发点其所用领域是表皮细胞因子深受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）基因突变测定，主要其所用领域于辨别不太可能从EGFR TKI想给与的即已期NSCLC病变。在ENSURE深退研究中的，ctDNA测定EGFR 19del和L858R基因突变的免疫为98.2%，脆弱接下来性为76.7%；而根据ctDNA测定交果遵从厄洛替尼用药的病变较放射治疗病变的PFS明崇祯显改善。基于该深退研究交果，FDA于2016年批文首款液体活体CDx新产品Cobas EGFR Mutation Test v2，随后国家药品监督管理管理工作局（NMPA）于2019年批文该款CDx新产品在国内上市。在FLAURA深退研究中的，ctDNA T790M HIV病变对奥希替尼的事实缓解率（objective response rate，ORR）与恶接下来性肿瘤组织起来活体HIV病变相符。据此，2020年FDA批文Guardant360 CDx其所用领域于白蛋白质ctDNA测定以辨别可想给与于奥希替尼用药的EGFR L858R/19del/T790M基因突变，埃万妥类药物（JNJ-6372）对其所的EGFR 20ins基因突变以及索托拉西布对其所的KRAS G12C基因突变的NSCLC病变。随后又批文适用范围更为广的一款CDx新产品FoundationOne Liquid CDx，主要其所用领域于辨别除此以外NSCLC EGFR脆弱基因突变（L858R/19del）、ALK芳基、MET 14号肽链跳跃，当年列腺癌BRCA1/2及ATM基因突变，上皮接下来性高血压/输卵管癌或原发接下来性腹膜癌BRCA1/2基因突变以及乳腺癌PIK3CA基因突变，以聘请其抑制剂。当当年EGFR、ALK、ROS1、BRAF、MET、RET、NTRK及KRAS（G12C基因突变）等传动装置基因突变HIV的即已期NSCLC一线抑制剂用药抑制剂相继获批，基于ctDNA测定交果的药理学用药可选择日益获得持有人药理学试验与想像深退研究的迹象默许。有深退研究看出，在移到接下来性NSCLC中的，对于指南推荐的生物体研究课题，ctDNA测定较数选用组织起来活体的病变可额外降低48%的所不含率，且可值得注意降偏颇高测定通报TAT（9 d vs 15 d，P<0.0001）。NSCLC NCCN指南2022 V1版推荐不宜卓有成效有创活体的即已期病变，或所获得的组织起来标本总质量不佳，或标本量不足以卓有成效必需要的多基因突变表征测定时，可以卓有成效包不含EGFR、ALK、ROS1、BRAF、MET、RET和KRAS（G12C基因突变）等在内的ctDNA NGS测定，但也同时提醒ctDNA NGS测定共存30%左右的骗比如说，以及附加分析方依此会深受到复制接下来性增生负面影响。2021年，国际肺癌深退研究协会（IASLC）实质指出，ctDNA可作为初诊NSCLC即已期病变完成基因突变分型的理论上工具，其交果不一定可与组织起来分析方依此交果互补，也可以作为病因生物体研究课题评核和系统对抑制剂用药药效的首选方针（其中的白蛋白质优先）。基于SOLAR-1深退研究交果，FDA于2019年批文第二款液体活体CDx新产品Therascreen PIK3CA RGQ PCR Kit。该新产品主要通过白蛋白质ctDNA测定辨别给与于PIK3CA抗病毒阿培利司（与氟维司群联合）用药的PIK3CA基因突变即已期HR+/HER2-乳腺癌病变。一项关于乳腺癌的荟萃分析方依此看出，ctDNA测定PIK3CA基因突变的脆弱接下来性和免疫分别为86%和98%。乳腺癌NCCN指南2022 V1版推荐，发作不可切除或移到接下来性HR+/HER2-乳腺癌其所完成基于穿刺组织起来或ctDNA的PIK3CA基因突变分析方依此，若首选ctDNA测定但交果圆形比如说时，其所再次完成组织起来测定核实。在胃食管腺癌中的，原发恶接下来性肿瘤和移到灶往往共存两者之间接下来性，ctDNA测定可全部都是面反映全部都是身恶接下来性肿瘤可能会，从而更为理论上地聘请精准用药。深退研究看出联合组织起来和白蛋白质ctDNA HER2导退测定可提颇高对食管癌及食管胃交界部癌病变抗HER2用药的推断内涵。肺癌和食管癌及食管胃交界部癌NCCN指南2022 V1表示同意不简便组织起来活体的肺癌和食管癌病变可考虑完成白蛋白质ctDNA NGS测定，但同时强调ctDNA测定为比如说时并不排除经组织起来分析方依此基因突变表征的共存。此外，由于亦然缺少理论上的用药手段，NCCN 指南2022 V1表示同意移到接下来性胰腺癌在无依此经活体获得足够组织起来时可考虑完成ctDNA NGS测定，且至少其所除此以外ALK、NRG1、NTRK、ROS1融合基因突变表征与BRAF、BRCA1/2、HER2、KRAS、PALB2基因突变基因突变分析方依此。皮肤恶接下来性黑色瘤NCCN 指南2022 V1也提及ctDNA NGS测定可作为其分子交构分型的替代接下来性手段。近期已有深退研究初步看出，基于ctDNA NGS测定肥肉选参与药理学试验病变很强足够的可靠接下来性，且在不负面影响药效的可能会下可提颇高试验退组率，缩粗壮侵退接下来性时间段。这些深退研究交果提示ctDNA NGS测定在药理学试验中的很强一定劣势和其所用领域当年景。然而，除了已获批的显现出病因新产品，大多数ctDNA在其他抑制剂用药聘请的理论上接下来性和实用接下来性迹象依然不足，亦然需要大量试验交果和药理学试验支柱，即已先深退研究其所尽不太可能划定期望适用年轻人，通过宽松内部设计的药理学深退研究适当检验其药理学意义。针对相同癌种，白蛋白质ctDNA恶接下来性肿瘤基因突变基因突变测定与恶接下来性肿瘤组织起来基因突变基因突变测定的相符接下来性仍共存较大差异，对于测定交果差异较大的癌种，其所总合考虑其药理学其所用领域安全性，慎重考虑ctDNA NGS测定作为组织起来基因突变测定替代手段的初步。

科学家实质：目当年已有药理学迹象默许ctDNA NGS测定可其所其所用领域于肺癌、乳腺癌、当年列腺癌、高血压等即已期本体恶接下来性肿瘤的显现出病因，但牵涉的传动装置基因突变及其表征多样与附加分析方依此基础之外有宽松限定，若超适其所症其所用领域时，表示同意与病变就测定必要接下来性、测定费用以及上都等细节完成适当可疑。ctDNA NGS测定已被国官民科学家实质或指南表示同意作为多种即已期恶接下来性恶接下来性肿瘤组织起来基因突变测定的替代手段，但依据其分析方依此交果实时制定药理学用药方针时仍需要颇高级别循证迹象默许。

2.2 ctDNA NGS测定对恶接下来性肿瘤用药药效评核及临床表现安全性各别的内涵选用恶接下来性肿瘤研究课题和CT等传统方依此评核分子交构抑制剂和免疫安全地抗病毒用药药效时无依此静态反映恶接下来性肿瘤相似接下来性接下来性的分子交构演化，ctDNA NGS测定可对恶接下来性肿瘤传动装置基因突变系统接下来性ctDNA的核素转变完成系统对，确实恶接下来性肿瘤用药其所答，其中的在NSCLC的EGFR抑制剂用药中的，EGFR脆弱基因突变20世纪清除可其所用领域于推断EGFR TKI药效。一项静态系统对ctDNA推断NSCLC药理学用药药效的想像深退研究推测，基线ctDNA不含量越颇高或表征数量越多，预示着OS越粗壮（用药后ctDNA清除的病变PFS和OS更为长），而且ctDNA也是与用药多样和评核时相点设置无关的独立自主临床表现状况。遵从免疫安全地抗病毒用药的即已期NSCLC病变，ctDNA响其所（降偏颇高>50%）与CT评核的药效相符，且与更为好的PFS和OS系统接下来性，其中的用药后5~9周20世纪影像评核为肿瘤稳固的病变，ctDNA评核为响其所的病变中的位OS值得注意延长（31.2个月末vs 18.4个月末，HR=0.36）。深受体型蛋白质酪氨酸酪氨酸D（protein tyrosine phosphatase，receptor type D，PTPRD）在多种恶接下来性肿瘤中的表示失活，在非鳞NSCLC 中的PTPRD酪氨酸交构域遭遇缺失接下来性基因突变时，二线用药能更为多从阿特珠类药物中的想给与 （中的位OS：24.04个月末 vs 9.69个月末，HR=0.16，P=0.0273），并且PTPRD是独立自主的临床表现状况，且不依赖于TMB和PD-L1表示或（和）TP53、EGFR、KRAS基因突变基因突变状态。在移到接下来激素抵抗当年列腺癌中的，ctDNA总体降偏颇高与PSA降偏颇高超过30%系统接下来性。TOPARP-A深退研究也推测，遵从PARP抗病毒用药的即已期当年列腺癌病变ctDNA降偏颇高与OS系统接下来性。但在近期一项黑色素瘤新设脑组织移到免疫安全地抗病毒用药深退研究中的推测白蛋白质ctDNA分析方依此并不能很好地系统对颅内肿瘤药效，这看出了胃肠道对ctDNA测定的不利负面影响。微小移去肿瘤（minimal residual disease，MRD）概念年所来自肾脏恶接下来性肿瘤。本体恶接下来性肿瘤的MRD概念更为多被叫做分子交构移去肿瘤（molecular residual disease，MRD），是指经过用药后，传统CT（除此以外PET/CT）或其他的试验室方依此不能推测，但通过液体活体推测的恶接下来性肿瘤可能分子交构精神状态，代表人恶接下来性肿瘤接下来共存和药理学进展不太可能。TracerX深退研究声称了ctDNA作为MRD测定的初步并评核了MRD测定对NSCLC术后发作的推断内涵。一项回顾接下来性深退研究划定了22可有遵从新基本功能用药（大多为新基本功能免疫用药）的ⅠB~ⅢA期NSCLC病变，其ctDNA静态分析方依此交果与术后依此临床评分移动接下来性相符，脆弱接下来性为100.00%、可靠接下来性为91.67%，其中的术后3~8 d ctDNA测定HIV的病变很强很低的发作安全性（HR=5.37），且基于ctDNA NGS测定推断分子交构发作暴力事件较CT规格评核的中的位时间段提当年了6.83个月末。2021年《非小蛋白质肺癌分子交构移去肿瘤科学家实质》将肺癌分子交构精神状态假设为在外周血可稳固测定出核素≥0.02%的ctDNA，除此以外肺癌传动装置基因突变或其他Ⅰ/Ⅱ类基因突变表征。一项通过测定ctDNA系统对MRD的药理学深退研究划定261可有可治疗破除切除的NSCLC病变，交果看出，术当年ctDNA测定推测36.4%的病变为HIV，断定不太可能共存未曾遭遇ctDNA脱落的恶接下来性肿瘤（non-shedding tumor），但不负面影响术后MRD系统对。该深退研究还推测术后单个资料流MRD测定比如说病变的临床表现值得注意相较之下于HIV病变（HR=0.08，95%CI：0.02~0.33），解释静态系统对可更为进一步提升推断可靠接下来性，这一交果首次假设了潜在皮肤病年轻人，且推测术后MRD比如说年轻人不能从基本功能用药想给与；数脑组织部发作的病变MRD 所不含比可有值得注意降偏颇高（20%，1/5）。在交肠癌病变中的，术后ctDNA月份系统对较CT规格评核一共可提当年16.5个月末推断分子交构发作暴力事件。多项深退研究断定，交膀胱癌术后及基本功能用药后ctDNAHIV与疾病发作相互间圆形强系统接下来性接下来性，术后的ctDNA分析方依此交果可作为临床表现推断依据。近期，首项基于ctDNA的交肠癌术后基本功能用药随器对照试验DYNAMIC交果看出，ctDNA聘请下的基本功能放射治疗方针可以在不负面影响病变总体无发作生存期的当年提下，降偏颇高接近50%（从28%降偏颇高至15%）的术后基本功能放射治疗率，避免了部分病变的违宪放射治疗。该深退研究为Ⅱ期交肠癌病变的术后基本功能用药决断提供了并不无需要依据。IMvigor010是一项颇高危肌层浸润接下来性尿路上皮癌基本功能免疫用药的Ⅲ期药理学深退研究，深退研究交果看出ctDNAHIV病变遵从阿替利珠类药物的中的位无病生存期和OS值得注意改善，发作安全性降偏颇高42%，生还安全性降偏颇高41%。目当年，数以百计公司推出本体瘤MRD测定新产品，但并无获批（FDA/NMPA）新产品上市，着力通过大检验、多中的心、当年瞻接下来性药理学试验检验这些新产品的药理学接下来接下来性。

科学家实质：即已期本体恶接下来性肿瘤分子交构抑制剂或免疫安全地抗病毒用药开始后，基于NGS测定的ctDNA总体定量和静态转变分析方依此，有望已是新兴的药效评核捷径。ctDNA MRD测定是全部都是新的个接下来性化核心技术其所用领域领域，亦然难以构建通用接下来性核心技术规格，着力通过大检验、多中的心、当年瞻接下来性的药理学试验检验其药理学接下来接下来性。ctDNA NGS测定在药理学上其所用领域于抑制剂或免疫用药评核和各别时，表示同意就测定内涵、上都和费用等完成适当可疑。

2.3 ctDNA NGS测定其所用领域于恶接下来性肿瘤于对细菌接下来性必要分析方依此的内涵于对细菌接下来性是负面影响恶接下来性肿瘤精准用药药效的关键接下来性状况，也是抗恶接下来性肿瘤抑制剂药理学其所用领域全部都是程管理管理工作面临的最大下一场。ctDNA NGS测定由于自身劣势现已广泛其所其所用领域于恶接下来性肿瘤于对细菌接下来性分子交构必要分析方依此及即已先的口服聘请。如遵从奥希替尼用药的即已期NSCLC病变遭遇细菌接下来性时，EGFR基因突变常所不含新的基因突变，其中的EGFR G796/C797基因突变占总24.7%，EGFR L792基因突变占总10.8%，EGFR L718/G719基因突变占总9.7%。基于ctDNA NGS测定推测ALK 抗病毒细菌接下来性必要很强移动接下来性两者之间接下来性，如克唑替尼细菌接下来性时常遭遇ALK L1196M、I1171T、D1203N、G1269A/F1174L等性疾病基因突变，不太可能共存周期接下来性地启动时系统接下来性的NRAS G12V、EGFR R108K、PIK3CA E545K等基因突变；塞瑞替尼细菌接下来性时常遭遇ALK G1128A、G1202R、G1269A、I1171T/E1210K等性疾病基因突变，不太可能共存周期接下来性地启动时系统接下来性KIT D820E、MET E1012*、EGFR P265_C291del等基因突变；阿来替尼细菌接下来性时常遭遇ALK G1202R、W1295C、G1202R/L1196M等性疾病基因突变，不太可能共存周期接下来性地启动时系统接下来性 EGFR P753S基因突变；洛拉替尼细菌接下来性时常遭遇ALK G1202R/G1269A 性疾病基因突变，不太可能共存周期接下来性地启动时BRAF V600E、MET D1246N等基因突变。在遵从抗EGFR类药物用药的移到接下来性交膀胱癌病变中的，RAS信号通路中的蛋白质编码基因突变的基因突变和/或EGFR胞外交构域（extra-cellular domain，ECD）偏离不太可能是导致细菌接下来性的主要分子交构必要。在肺癌用药中的，ctDNA系统对推测HER2拷贝数偏离提示曲妥珠类药物细菌接下来性接下来性，因此指出ctDNA中的的HER2拷贝数可作为系统对曲妥珠类药物用药进展期肺癌的药效量化。恶接下来性肿瘤免疫安全地抗病毒用药于对细菌接下来性必要繁复，用药可选择阻碍下的恶接下来性肿瘤亚复制的发展数为部分原因。在当当年最活跃的恶接下来性肿瘤转化深退研究领域中的，ctDNA抑制剂基因序列、全部都是肽链和（或）全部都是基因突变组测定，乃至单蛋白质组学、弘基因突变组、维度基因突变组学等诸多新方依此已开始被其所用领域。在阿维鲁类药物（avelumab）联合EGFR类药物、改良FOLFOX6方案用药微卫星稳固、RAS/BRAF 野生型移到接下来性交肠癌的Ⅱ期药理学试验中的，基于ctDNA NGS测定推测可选择接下来性阻碍下会性疾病PD-L1基因突变亚复制演化，少数病变可出现导致RNA衰减的PD-L1 K162fs基因突变以及提升蛋白质降解的PD-L1 L88S亚复制。然而，尽管目当年的深退研究看出基于ctDNA NGS测定在追寻恶接下来性肿瘤细菌接下来性分子交构必要和口服聘请中的有一定劣势，劳其可为疑难或繁复病可有的药理学病因或用药方案制定提供关键接下来性参看，但是作为一种新兴的核心技术手段，亦然缺少足够的药理学资料支柱其在药理学出发点中的常规其所用领域。相信随着药理学理论上接下来性和接下来接下来性接下来性深退研究的不断深退，ctDNA测定在恶接下来性肿瘤细菌接下来性多方面将发挥更为大的内涵，从而使更为多病变想给与。

科学家实质：在药理学环境中的，ctDNA NGS测定可其所用领域于辨别分子交构抑制剂用药的细菌接下来性必要，劳其对于疑难繁复的恶接下来性肿瘤病变，该交果有利于即已先的用药可选择决断。免疫安全地抗病毒用药于对细菌接下来性必要繁复，用药可选择阻碍下的恶接下来性肿瘤亚复制的发展数为其部分原因，ctDNA抑制剂基因序列、全部都是肽链和（或）全部都是基因突变组测定数作为其转化深退研究工具之一。

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ctDNA NGS测定的规格

3.1 ctDNA NGS测定的的试验室允许3.1.1 户外允许 其所宽松遵循恶接下来性肿瘤二代基因序列的试验室的概念内部设计与允许，强调“各区内独立自主，注意风向，相适应，方便管理工作”依此则，装备满足卓有成效ctDNA NGS基因序列这两项所需要的仪器设备。若的试验室同时卓有成效基因突变组DNA和ctDNA测定，其所设置相同的检验制取区内、月末刊少年制取区内，以避免颇高浓度组织起来小分子交构对偏颇高浓度ctDNA的污染。3.1.2 氢化耗材允许 的试验室其所优先可选择获得NMPA三类医疗器械证的测定氢化和配套耗材。若暂时没有，最简单经过器动接下来性核实的药理学的试验室自建这两项（laboratory developed test，LDT）氢化替代。LDT除此以外以下可能会：FDA持有人或批文但的试验室完成了删减的氢化或测定系统；未曾经FDA持有人或批文的氢化或测定系统；未曾提供器动接下来性量化的氢化或测定系统。所有LDT氢化耗材在其所用领域于测定当年其所完成器动接下来性核实，并形成氢化制取和用于的规格操作方法基本（standard operating procedure，SOP），报上级主管部门核准。的试验室所构建的LDT氢化禁止在本的试验室以外的的试验室用于。每批氢化其所完成质检，并留存附加记录。3.2 的试验室基础构建3.2.1 测定时序与总质量压制 ctDNA NGS测定的构建与改进牵涉分析方依此当年、分析方依此中的以及分析方依此后的三个过渡阶段多个两步，的试验室总质量管理管理工作需要横穿ctDNA NGS测定的整个时序。分析方依此当年过渡阶段除此以外检验通过观察、运输、留存等妥善处理，每个两步其所制定与的试验室值得一提的是相符合的SOP，并按照SOP执行。分析方依此中的过渡阶段除此以外“湿试验”和“干试验”两个两步，“湿试验”除此以外小分子交构所不含、引物或电子束内部设计合成、月末刊少年制取、母舰基因序列等两步，其中的月末刊少年制取可可选择繁育捕捉到或导退子建库，该过渡阶段的质控其所对小分子交构所不含中的的小分子交构浓度、纯度和相片分布区做出附加允许并遵照执行；“干试验”涵盖生物体讯息学分析方依此时序各两步，该过渡阶段质控其所对最偏颇高基因序列剖面、平之外基因序列剖面、覆盖面积之外一接下来性、鸟嘌呤和胞嘧啶（guanine and cytosine，GC）不含量、氨基酸辨别总质量值、比对总质量值和在靶率等采取附加允许并遵照执行。分析方依此后过渡阶段除此以外测定通报点出、分子交构恶接下来性肿瘤科学家委员会（molecular tumor board，MTB）讨论和遗传咨询等，该过渡阶段其所制定交果通报及点出SOP，并遵循可靠、及时和适当的依此则。此外，的试验室其所根据实际可能会，构建室内总质量压制，室间总质量评分以及室间比对等SOP，并遵照执行。3.2.2 氢化器动接下来性检验或器动接下来性核实 的试验室用于已获批的颇高通量基因序列氢化卓有成效药理学测定维修服务当年，必须对氢化完成器动接下来性检验。如果的试验室偏离已批文氢化原则上的期望用途、氢化组分、操作方法时序，则按照LDT氢化允许完成管理管理工作，药理学测定当年需要对测定系统（包不含人、器、需用、依此、环等）的分析方依此器动接下来性完成核实。的试验室其所构建氢化器动接下来性核实测定操作方法全部都是月份不断SOP，明崇祯确氢化的分析方依此器动接下来性量化和测定上都。分析方依此器动接下来性评分量化至少其所除此以外精密度、精度、分析方依此脆弱接下来性、分析方依此免疫（除此以外抑制物质）、可通报范围。3.3 检验抽取、妥善处理依此则3.3.1 检验通过观察和当年妥善处理 表示同意选用不含蛋白质纤维素的抗凝管，如Streck采毛细血管等一般来讲小分子交构备有采毛细血管，的试验室也可根据实际可能会可选择简便于的采毛细血管。根据测定允许通过观察适量的外周血，一般为10 mL，采血后轻柔颠倒8~10次，使留存液和肾脏适当混合，避免凝血或溶血遭遇。肾脏离体后其所及即已送去至测定的试验室。的试验室其所根据实际可能会制定留存运输时限及浓度允许。表示同意选用两步离心依此复合白蛋白质，第一步：2~8 ℃，1 600~1 900 g离心10 min，将上清移到至新的离心管中的；第二步：2~8 ℃，16 000~20 000 g离心10 min，移到上清至新离心管。复合白蛋白质可并不无需要抽提ctDNA，或留存于-80 ℃至用于时，留存月份不断中的其所避免月份不断冻融。3.3.2 检验制取与质控 药理学上目当年常用的cfDNA所不含方依此有离心柱依此和磁珠依此，其所根据测定允许可选择简便于的方依此。所不含的小分子交构其所在2~8 ℃下储存且不超过24 h；若超过24 h，表示同意在-30 ℃至-15 ℃下储存，并避免月份不断冻融。完成月末刊少年制取当年，表示同意选用简便于的核心技术方依此对获得的cfDNA总量和相片分布区完成分析方依此，确实是否满足的试验室制定的质控允许。若不满足即已先测定需要求，其所采取附加措施妥善处理，必要时重新通过观察检验。科学家实质：ctDNA NGS测定的试验室总质量管理管理工作需要横穿全部都是程，ctDNA抽取、检验妥善处理和系统设计月份不断其所按照规格化和药理学检验程序完成，最大程度防止因操作方法差异而随之而来的骗比如说不太可能。检验通过观察表示同意选用不含蛋白质纤维素的抗凝管，及即已完成白蛋白质复合，所不含的cfDNA表示同意在24 h内完成即已先测定，否则，放置-30 ℃至-15 ℃下储存并避免月份不断冻融。3.4 ctDNA NGS测定核心技术要点3.4.1 月末刊少年构建方针 选用NGS方依此完成ctDNA测定的抑制剂基因序列方针主要分为两种：基于繁育捕捉到的抑制剂NGS（hybrid capture NGS）和基于导退子的抑制剂NGS（amplification-based NGS）。基于繁育捕捉到的抑制剂NGS方依此是通过捕捉到电子束与基因突变组中的特定区内域繁育，从而获得目的区内域的数列并完成分析方依此的方依此。该方依此操作方法两步多，月份不断相较之下繁复，无需要1~2 d完成建库母舰，可以测定点基因突变，小相片的插退缺失和拷贝数表征，以及DNA层面的基因突变芳基，且可以推测一些可能融合，测定灵敏度达95%以上。能够数列捕捉到依此建库用于的电子束内部设计有DNA电子束和RNA电子束，主要对能够区内域完成抑制剂非金属，确保检验能够数列完全部都是非金属，提颇高非金属效率和覆盖面积的之外一接下来性，理论上降偏颇高基因序列成本。基于导退子的抑制剂NGS方依此依赖多重PCR导退两步非金属能够数列。试验月份不断中的，基于导退的月末刊少年制取的值得一提的是时间段不一定比繁育捕捉到方依此粗壮。对于基因突变可有较少，口服系统接下来性热点基因突变明崇祯确的panel可以选用抑制剂导退子基因序列，导退之外一接下来性在引物内部设计时无需要改进调试。两种基因序列方针有别对错，的试验室可依据测定的抑制剂基因序列panel形状、基因突变多样、基因突变多样及行政处分允许等可选择相同基因序列方针，并依据专利核心技术完成适当改进，从而提升基因突变月末刊少年的构建总质量和效率。不论选用何种方依此，每个测定这两项都其所设定明崇祯确的合格月末刊少年规格，母舰基因序列当年其所对月末刊少年浓度和月末刊少年相片分布区完成分析方依此，合格的月末刊少年规格其所除此以外相片是否相较之下高度集中的，若无一般来讲接头，若无接头二聚体，相片形状是否在推荐月末刊少年相片范围内等细节。3.4.2 分子交构页面方针 对于cfDNA检验的基因突变测定少于期望超出0.1%甚至更为偏颇高时，数靠降低基因序列剖面已不足以提升灵敏度，建库月份不断PCR交果引退的差错和基因序列造成的系统误差亦会降低骗HIV交果。用于分子交构页面核心技术和改进对其所的生物体讯息分析方依此设置，可以调制由于基因序列游戏平台随器误差导致的骗HIV交果，从而实现很低的灵敏度。其法则是在月末刊少年制取月份不断中的，通过添加一段3~8 bp随器数列作为分子交构页面（unique molecular identifier，UMI），该依此可以灵敏地辨别PCR重复相片并校亦然PCR导退差错，从而完成亦然确的DNA相片溯源，提供更为可靠的基因突变分析方依此。3.4.3 参数确定方针 对于大多数本体恶接下来性恶接下来性肿瘤，白蛋白质中的的ctDNA总体较偏颇高，基因突变等位基因突变积分在即已期移到接下来性疾病中的不一定偏颇高于10%，在均匀分布即已期非移到接下来性疾病中的偏颇高于1%。ctDNA总体在肺癌20世纪和皮肤病接下来性用药后更为偏颇高，其基因突变等位基因突变频率不一定小于0.1%。因此，无需要移动接下来性灵敏的方依此测定白蛋白质ctDNA。中的国恶接下来性肿瘤传动装置基因突变分析方依此联盟（CAGC）表示同意白蛋白质cfDNA标本的NGS理论上基因序列剖面其所超出1 000×以上，并其所在80%以上的能够区内域超出这个剖面，而非所有区内域的平之外，否则在区内域间覆盖面积波动较大的可能会下，会有大量区内域出现覆盖面积不够的可能会。肺癌微小肿瘤移去假设、测定与其所用领域中的国胸部恶接下来性肿瘤学科学家实质中的指出：选用NGS抑制剂基因序列多基因突变测定panel完成MRD测定时，基本核心技术规格是可稳固所不含核素≥0.02％的ctDNA。NCCN指南推荐且其所用领域相较之下茁壮的Signatera导退子NGS核心技术的平之外基因序列剖面颇高达100 000×以上。这也提示20世纪肺癌测定和微小肿瘤移去测定无需要很低的基因序列剖面。目当年测定方针数以百计，相同方针对基因序列剖面和广度的规格也有待更为进一步的循证临床迹象默许。3.4.4 基因序列游戏平台可选择 目当年用于较多的NGS基因序列游戏平台是因美纳（Illumina）、华大智造（MGI）和赛默飞（Thermo fisher）游戏平台。尽管核心技术器动接下来性相似，但游戏平台相互间DNA投退允许、氢化成本、运行时间段和读写较宽等之外共存差异。Illumina游戏平台颇高通用接下来性和可扩展接下来性颇高，可对相同形状抑制剂基因序列panel完成灵活分析方依此。同时也无需要很低的DNA和RNA投退，基因序列时间段长，基因序列成本颇高，无需要更为全部都是面的生物体讯息学默许。MGI游戏平台在有颇高通用接下来性和可扩展接下来性的同时，还很强基因序列重复率偏颇高、理论上资料利用率颇高、基因序列速度快、基因序列成本相较之下较偏颇高等劣势，劳其简便其所用领域于无需要颇高资料量的ctDNA测定。Thermo fisher游戏平台通量小、基因序列时间段粗壮、基因序列成本偏颇高，同时装备内置生物体讯息学分析方依此时序，便于资料系统设计分析方依此。总之，三大基因序列游戏平台有别对错，相同的试验室可以依据检验量、基因序列资料量以及行政处分允许等可选择附加的基因序列游戏平台。3.5 生信方依此允许3.5.1 基于分子交构页面核心技术的资料质控和资料分析方依此 ctDNA测定常出现PCR重复数列比可有颇高（50%~90%）、PCR导退和基因序列差错等引退的剧中噪音颇高等问题。同时，肾脏中的白蛋白质的复制接下来性增生基因突变也负面影响ctDNA表征的鉴定。基于分子交构页面核心技术的分析方依此时序可希望理论上转换成剧中噪音，匹配白蛋白质检验或剧中库的构建可理论上转换成来自白蛋白质中的复制接下来性增生基因突变引退的骗HIV，提升ctDNA测定的可靠接下来性。UMI通过给每一条更即已DNA相片加上一段特有的页面数列，经月末刊少年构建和PCR导退后一齐基因序列，根据相同的页面数列可以区内分相同可能的DNA模板，分辨叫做PCR导退及基因序列月份不断中的随器差错消除的骗HIV基因突变，辨别cfDNA中的真亦然可能于恶接下来性肿瘤的基因突变，从而提颇高测定灵敏度和免疫，达0.1%的所不含限。一般推荐1条UMI对其所并至少3条reads。3.5.2 基因序列噪音压制 构建剧中库调制杂讯的大体初衷是通过用于相同基因序列时序的检验估算基因突变组圆周对其所区内域或氨基酸的基因序列信噪比，然后用于骗设检验等总和方依此比较能够检验对其所圆周的基因突变频率是否值得注意颇高于估算推断的基因序列信噪比。通过对病变恶接下来性肿瘤检验构建剧中库调制杂讯的常用方依此有SiNVICT和OutLyzer。SiNVICT用于恶接下来性肿瘤检验算出出一段基因突变组区内域的噪音总体，通过算出信噪比的方依此调制潜在的骗HIV交果。OutLyzer通过算出能够基因突变附近200 bp内的每个圆周的基因序列信噪比，并通过多次Thompson’s Tau Test调制离群杂讯。在最简单检验较为贫乏的可能会下，用于多个病变的亦然常检验构建剧中库能较可靠地估算杂讯总体。其中的代表人方依此有Mutect1/Mutect2（GATK），该依此用于不少于40个没有恶接下来性免疫污染的亦然常检验构建剧中库。在此基础上蓬勃发展的基于相同算依此的构建剧中库算依此，如基于特征函数区的TNER、基于颇高斯分布区三维的IDES、基于泊松分布区的AmpliSolve等，之外可理论上提升基因突变所不含可靠率和召回率，转换成剧中噪音。3.5.3 复制接下来性增生表征调制 RAZAVI等推测ctDNA共存大量可能可能的基因突变表征（variants of unknown source，VUSo），大部分VUSo基因突变核素<1%，与检验基因序列剖面、DNA起始量、亚基的基因序列剖面、检验染色体拷贝数无系统接下来性接下来性，且有很好的重复接下来性交果。在白蛋白质检验中的也测定到大量的VUSo，且与比率圆形亦然系统接下来性，声称了ctDNA中的的大部分VUSo来自白蛋白质，并非可能于基因序列剧中噪音，这部分VUSo基因突变被假设为复制接下来性增生基因突变。因此，在相同ctDNA颇高通量基因序列药理学其所用领域场景，无需要考虑ctDNA中的包不含有叫做白蛋白质的复制接下来性增生基因突变。ctDNA测定时通过匹配的白蛋白质检验，或者汇集拆分测定到的复制接下来性增生基因突变，构建复制接下来性增生基因突变剧中库，可理论上希望转换成复制接下来性增生造成的骗HIV。3.5.4 资料的储存与管理管理工作 随着基因序列剖面的降低，ctDNA下器资料理论上安全部都是的储存无需要装备附加的基础设施。颇高通量基因序列会生成大量文件，下器的fastq或bam更即已文件、vcf交果文件等需要长期留存，同时其所留存好基因序列月份不断中的完整的日志文件，以便区内分颇高通量基因序列分析方依此软件版本讯息、追溯精神状态交果。病因的试验室其所留存系统接下来性资料至少3年，并在系统接下来性核心技术人员的默许下制定资料备份计划和恢复计划。科学家实质：ctDNA NGS测定其所根据这两项需要求可选择核心技术路线，可依据测定基因突变数量及覆盖面积范围形状可选择相同基因序列方针。在完成基于ctDNA的超颇高灵敏度基因突变测定时，表示同意用于分子交构页面核心技术和改进对其所的生物体讯息分析方依此设置，以降偏颇高由于基因序列游戏平台随器误差导致的骗HIV交果；表示同意通过构建基因序列噪音和复制接下来性增生剧中库的方依此降偏颇高复制接下来性增生及剧中噪音带来的负面影响。3.6 通报允许3.6.1 专业团队建设 的试验室负责人其所很强药理学临床专业剧中、分子交构生物体学系统接下来性管理工作经历、副颇高级以上专业核心技术职称。主要通报签发人员其所具备药理学临床、分子交构生物体学和遗传学等多种专业剧中，了解恶接下来性肿瘤的药理学用药指南以及药理学试验最新进展，最好很强2 年及以上恶接下来性肿瘤组织起来多基因突变NGS测定分析方依此管理工作经历。通报如牵涉基因突变胚系表征类群与药理学意义阐释，表示同意交合药理学遗传咨询同步卓有成效。旨在完成ctDNA NGS测定全部都是面分析方依此与繁复药理学场景其所用领域的器构，鼓励构建由多学科科学家组成的MTB。3.6.2 通报细节 ctDNA NGS测定的药理学通报其所包不含以下细节：⑴深受检者的基本讯息。其所明崇祯确包不含深受检者姓名、接下来性别、出生日期或比率、遵从测定的日期、测定的目的（无需要明崇祯确疾病发病状态或携带者状态）和深受检者的药理学指征（其所至少包不含疾病的病因或初步病因）等。⑵检验讯息。每份检验其所有唯一标识，注明崇祯检验多样、通过观察时间段、通过观察部位、送去检时间段、测定通报时间段和检验主要质控可能会（如DNA总质量评核以及基因序列总质量评核等）。⑶的试验室讯息。除此以外的试验室名称、试验操作方法人员、通报审核人员、联系手段。⑷测定这两项。除此以外基因突变panel的测定亚基及测定范围、测定仪器、测定氢化，是否为NMPA批文用于的测定氢化以及NMPA获批的基因突变亚基讯息，或LDT氢化、测定方依此、测定少于等。⑸测定交果及表征点出。对基因突变表征的测定交果完成点出，如所不含的基因突变型、表征交果、染色体转变可能会、测定交果的致病接下来性分级、抑制剂讯息及药理学意义、表征点出引用的参看手抄本等；对于多次测定的病变，通报无需要体现既往测定交果，并总合点出本次测定交果。⑹标注测定方依此的的试验室内部检验交果，测定上都及不确定接下来性，以及更为进一步测定的表示同意。3.6.3 表征交果的命名规则 对基因突变表征的描述其所遵循一定的依此则和基本，推荐参看人类基因突变组表征协会命名指南（www.hgvs.org，登录日期2022年6月末22日），转录本的可选择表示同意选用基因突变座参看基因突变组数列资料库（Locus reference genomic；www.lrg-sequence.org，登录日期2022年6月末22日） 界定的转录本或多个国际资料库公认的主要转录本。对遗传接下来性恶接下来性肿瘤系统接下来性基因突变表征的解释，表示同意以美国临床遗传学学院（American college of medical genetics and genomics） 指南为规格，在测定交果中的列出具体的表征亚基讯息，除此以外基因突变名称、所参看的人类基因突变组版本号、转录本参看数列版本号、核苷酸表征、氨基酸表征、肽链/内不含子序号、等位基因突变杂合接下来性、染色体编号及圆周等。3.6.4 聘请口服的循证分级基本 对于恶接下来性肿瘤体蛋白质基因突变的药理学意义点出，表示同意依据显现出病因、药理学指南、资料库或手抄本迹象完成分级，可以将恶接下来性肿瘤体蛋白质基因突变基因突变分为药理学意义明崇祯确（Ⅰ级）、有潜在药理学意义（Ⅱ级）、药理学意义不明崇祯确（Ⅲ级） 和良接下来性或不太可能良接下来性基因突变（Ⅳ级）。的试验室其所构建基因突变药理学意义类群及分级和通报的SOP，且SOP其所至少除此以外以下两个多方面：⑴对体蛋白质基因突变基因突变完成分级的时序; ⑵明崇祯确通报中的其所包不含哪一级或哪几级基因突变亚基。分级的时序其所有记录，除此以外迹象可能的指南、手抄本、资料库、迹象等级、分级交果等。药理学迹象决定基因突变亚基分级，可参看AMP、ASCO、CAP联合发布的恶接下来性肿瘤检验基因序列基因突变点出实质。对胚系基因突变的药理学意义点出，可参看中的外诊疗指南及关键接下来性参看手抄本，Online mendelian inheritance in man （https：//omim.org，登录日期2022年6月末22日）和美国ACMG指南等资源。目当年，对于胚系基因突变分级主要参看ACMG指南，其将表征亚基致病接下来性等级分为致病、疑似致病、药理学意义未曾明崇祯、疑似良接下来性和良接下来性等5个等级。通报中的其所列出与遗传接下来性恶接下来性肿瘤（如遗传接下来性乳腺癌/高血压总合征、Lynch总合征等） 系统接下来性的致病以及疑似致病表征，并对表征的致病接下来性完成分析方依此点出。对于意义不明崇祯亚基的妥善处理，的试验室需要制定系统接下来性政策，确定是否通报药理学意义不明崇祯的亚基，并附上解释和参看资料库，并且要在通报中的注明崇祯本的试验室出具药理学通报的规则。

3.6.5 其他测定方依此的交果检验 对肾脏检验完成颇高通量基因序列测定时如出现较偏颇高核素的基因突变交果（不一定肾脏检验偏颇高于测定少于） 时，表示同意总合评核颇高通量基因序列试验游戏平台器动接下来性、基因序列剖面以及恶接下来性免疫比可有等状况。同样对于抑制剂用药系统接下来性的基因突变，表示同意用于其他测定方依此更为进一步检验核实，如数字PCR等方依此。3.6.6 测定上都单方面 外周血中的ctDNA不含量不足，由于深受检者携带的基因突变不太可能没有包不含在测定基因突变曲谱中的等原因，测定不太可能共存骗比如说交果。如果白蛋白质测定交果为比如说，必要时仍需要选用其他多样检验完成检验。另外，由于大多数基于ctDNA NGS未曾匹配测定白蛋白质，如果共存胚系表征或由复制接下来性增生引起的体蛋白质基因突变，也不太可能导致骗HIV交果，因此在交果通报中的其所对ctDNA的测定基因突变范围、测定方依此和测定少于等关键接下来性器动接下来性量化完成解释。当通过ctDNA NGS测定完成抑制剂口服聘请或遗传接下来性恶接下来性肿瘤安全性评核时，其评核规格其所总合考虑传动装置分子交构暴力事件、药理学用药状况以及分析方依此肥肉选方针。ctDNA NGS药理学测定通报的点出对恶接下来性肿瘤病变临床表现、发作系统对、口服聘请很强关键接下来性的参看内涵。因此，通报其所该明崇祯确、简洁、可靠，并很强适当的点出、可信接下来性和权威接下来性。

科学家实质：ctDNA NGS药理学测定通报其所包不含深受检者基本讯息、检验讯息、的试验室讯息、测定这两项、测定交果及表征点出、测定方依此的的试验室内部检验交果、测定上都及不确定接下来性以及更为进一步测定的表示同意等细节。的试验室其所构建通报SOP，表示同意根据国官民手抄本、实质指南、药理学试检验据和出发点对所不含的恶接下来性肿瘤基因突变基因突变完成类群或分级通报。

04

ctDNA NGS测定药理学其所用领域展望

目当年已有部分基于基因突变表征讯息的复合推断生物体研究课题其所用领域于推断免疫安全地抗病毒和分子交构抑制剂用药药效，从而对病变完成各别，如微卫星不稳固接下来性（microsatellite instability，MSI）和恶接下来性肿瘤基因突变承受（tumor mutation burden，TMB）。药理学深退研究断定基于ctDNA NGS测定的bMSI（blood MSI）和bTMB（blood TMB）很强免疫安全地抗病毒药效推断内涵。FDA于2020年8月末26日批文基于ctDNA NGS资料拟合bMSI和bTMB的氢化盒其所用领域于泛本体瘤多个抑制剂抑制剂及免疫安全地抗病毒的显现出病因。但bMSI和bTMB在药理学其所用领域中的深受多种状况负面影响，如检验通过观察时间段、测定panel基因突变覆盖面积范围、panel形状、基因序列剖面、生信算依此及阈值设定等，因此还无需要更为多的当年瞻接下来性药理学深退研究迹象默许ctDNA NGS资料拟合的bMSI和bTMB的药理学其所用领域当年景。同源重组修复毛病（homologous recombination deficiency，HRD）测定在聚腺苷二磷酸核糖核酸聚合酶抗病毒和铂吗啡脆弱接下来性推断及恶接下来性肿瘤易感接下来性评核中的很强关键接下来性的药理学其所用领域内涵。HRD状态可通过同源重组系统接下来性基因突变基因突变（homologous recombination repair，HRR）测定和基因突变瘢痕（genomic scar，GS）测定两种手段确实。目当年数有两种组织起来测定氢化Myriad MyChoice CDx以及Foundation FocusTM CDx BRCA LOH获得FDA批文其所用领域于显现出病因及补充病因。两者之外选用HRR联合GS测定方针评核HRD状态。由于基于ctDNA NGS对GS完成评核核心技术上很强前所未曾见下一场，所以目当年基于ctDNA NGS测定完成HRD评核主要高度集中的在HRR信号通路基因突变SNP测定，但国官民对HRR基因突变的假设亦然缺少统一规格；另外，随着测定核心技术的退步，基于ctDNA NGS评核GS迅速已是不太可能，但目当年基于ctDNA NGS测定评核HRD亦然有前所未曾见的追寻维度。ctDNA中的包不含小分子交构数列、亚基基因突变、拷贝数、底物、MSI、数列较宽、数列核素、出现的时空手段而、在基因突变组上的位置相似接下来性、起始亚基和终止亚基相似接下来性等丰富的生物体讯息，如恶接下来性肿瘤cfDNA相片的较宽分布区、核小体位置与亦然常蛋白质值得注意相同，这些讯息可其所其所用领域于恶接下来性肿瘤侵退接下来性和病因中的。为了更为好地拆分多源两者之间讯息，更为全部都是面描绘恶接下来性肿瘤生物体相似接下来性，很偏颇高ctDNA资料的执教，资料妥善处理、剖面学习等人工智能算依此也被大量其所用领域到恶接下来性肿瘤的侵退接下来性和病因中的。CancerSEEK的肺癌即已肥肉这两项通过系统对ctDNA中的16个基因突变的基因突变及血清8个蛋白质质生物体研究课题总体，并构建 Logistic回归模型，交果该模型在8种恶接下来性肿瘤共包不含1 005可有病变中的的脆弱接下来性为69%~98%，免疫为 99%。最新的其所用领域资料妥善处理类群器基本功能的剖面底物基因序列能测定到52%~81% 药理学分期为ⅠA~Ⅲ期的病变，且测定限偏颇高至万分之一，看出了很低的脆弱接下来性和免疫（免疫为96%，95%CI：93%~98%）。总之，基于ctDNA NGS测定的bTMB很强免疫安全地抗病毒药效推断内涵，但仍有诸多状况负面影响bTMB测定在药理学中的的其所用领域，未曾来还需要卓有成效更为多的当年瞻接下来性药理学深退研究。资料妥善处理等人工智能算依此不数能降偏颇高骗HIV、提颇高灵敏度，还能理论上拆分多维度的两者之间讯息完成全部都是面分析方依此，很偏颇高ctDNA资料执教，是ctDNA资料分析方依此的主要方向。

意见分歧单方面：本实质由科学家组内部新成员针对接下来性讨论推断，科学家组重写月份不断中的未曾遵从生物体医药公司任何表现形式的赞助，所有科学家组新成员之外单方面不共存意见分歧。实质重写科学家委员会

史学技术顾问（按姓名汉语拼音排列）

步 弘 武汉大学华西病房

邢金良 海军陆战队军医大学

吴 李文 成都市中的病房

重写组长（按姓名汉语拼音排列）

辇伟奇 成都市中的病房

于津浦 天津教学医院恶接下来性肿瘤病房

袁响林 华中的科技大学东华大学药学院另有东华大学病房

张海伟 成都大学另有恶接下来性肿瘤病房

主要执笔科学家（按姓名汉语拼音排列）

杨 明崇祯 华中的科技大学东华大学药学院另有协和病房

程 贞 成都市中的病房

申 和黄 北方地区教学医院北方地区病房

汉万燕 成都大学另有恶接下来性肿瘤病房

问罪华 武汉桐树生命科学香港）有限公司

劳 贞 中山大学另有第一病房

张 哲 广东燃石临床检验所香港）有限公司

赵伟和黄 天津教学医院恶接下来性肿瘤病房

重写组科学家（按姓名汉语拼音排列）

白 莉 中的国人民解放军总病房

步 弘 武汉大学华西病房

杨 明崇祯 华中的科技大学东华大学药学院另有协和病房

曹小飞 珠海市第一人民病房

程 贞 成都市中的病房

陈 锐 成都大学另有恶接下来性肿瘤病房

陈 威 杭州芯颇高地生命科学香港）有限公司

戴晓芳 华中的科技大学东华大学药学院另有协和病房

李德 昆 成都教学医院另有第三病房

颇高娅文 中的南大学湘雅二病房

郭 昊 南京先声临床检验的试验室香港）有限公司

李炘亦然 山西省榆次恶接下来性肿瘤病房

梁志欣 解放军总病房第八临床中的心

林晓钢 成都大学光电工程系

杨华文 成都大学另有三峡病房

杨 福 杭州追溯聚禾生命科学香港）有限公司

潘 钢 成都市中的病房

马 杰 河南省恶接下来性肿瘤病房

马 鑫 解放军总病房第一临床中的心

倪 梦 深圳市华大基因突变股份香港）有限公司

辇伟奇 成都市中的病房

聂广杰 北方地区教学医院清远病房

邱李辉 武汉桐树生命科学香港）有限公司

全部都是雪萍 武汉桐树生命科学香港）有限公司

单光宇 杭州优迅医疗器械香港）有限公司

申 和黄 北方地区教学医院北方地区病房

苏春霞 东华大学大学另有苏州市肺科病房

孙建国 陆军军医大学第二另有病房

汉万燕 成都大学另有恶接下来性肿瘤病房

汉衡山 成都市人民病房

中山王晚萍 山西省榆次榆次人民病房

中山王弘伟 解放军总病房第四临床中的心

中山王怀碧 成都市中的病房

中山王秋实 陆军独特临床中的心

吴 李文 成都市中的病房

夏理应 慈溪钱塘鼎晶生物体医药科技有限责任公司

邢金良 海军陆战队军医大学

姚 华 成都市中的病房

其所李文武 武汉大学华西病房

问罪华 武汉桐树生命科学香港）有限公司

劳 贞 中山大学另有第一病房

于津浦 天津教学医院恶接下来性肿瘤病房

余秋波 成都教学医院

袁响林 华中的科技大学东华大学药学院另有东华大学病房

袁 睿 成都大学临床部

张海伟 成都大学另有恶接下来性肿瘤病房

张 琼 成都市中的病房

张 翼 杭州优乐复生临床检验的试验室香港）有限公司

张 哲 广东燃石临床检验所香港）有限公司

赵伟和黄 天津教学医院恶接下来性肿瘤病房

赵雪琴 西关街道人民病房

赵 征 陕西省恶接下来性肿瘤病房

郑晓东 成都大学另有恶接下来性肿瘤病房

周 进 四川省恶接下来性肿瘤病房

周一鸣 角井（杭州）生物体核心技术香港）有限公司

朱师达 深圳市华大基因突变股份香港）有限公司

作者：中的国抗癌协会恶接下来性肿瘤标志专业委员会

可能：中的国肺癌防治周报，2022年6月末第14卷第3期

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